原理:革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类,是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌,是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。
步骤:
(一)涂片固定
在干净的载玻片中央滴加一滴蒸馏水,用接种环进行无菌操作,挑取培养物少许,置载玻片的水滴中,与水混合做成菌悬液并涂布成直径约1cm的薄层。
(二)染色
在固定过的涂片菌膜上滴加草酸铵结晶紫染液,染色液应完全覆盖整个菌膜,染色1min。
(三)水洗
染色到一定的时间,拿住玻片使之成450角,用细小的水流把多余的染料冲洗掉,被菌体吸附的染料则保留。
(四)媒染
加碘液覆盖涂面染1 min。在媒染处理时,媒染剂与染料形成不溶性的化合物,可增加染料和细菌的亲和力。
(五)水洗,用吸水纸吸去水分
用细小的水流缓慢冲洗涂片上的染色液,用吸水纸吸干。
(六)脱色
加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色, 20 s~30 s后再进行水洗,吸去水分。
(七)复染
蕃红染色液染色10 s后, 自来水冲洗。
(八)干燥,镜检
染色的结果,革兰氏正反应菌体都呈紫色,负反应菌体都呈红色。
扩展资料
标本干燥后即进行固定,固定的目的有三个:
(1)杀死微生物,固定细胞结构。
(2)保证菌体能更牢固的粘附在载玻片上,防止标本水洗时被水冲洗掉。
(3)改变染料对细胞的通透性,因为死的原生质比活的原生质易于染色。
参考资料来源:百度百科-革兰氏染色法
参考资料来源:百度百科-革兰氏染色
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:
1)涂片固定。
2)草酸铵结晶紫染1分钟。
3)蒸馏水冲洗。
4)加碘液覆盖涂面染约1分钟。
5)水洗,用吸水纸吸去水分。
6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。
7)蕃红染色液(稀)染1分钟后,蒸馏水冲洗。干燥,镜检。
原理:染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。
革兰氏染色法的意义
革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌,把众多的细菌分为两大类,革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。在治疗上,大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感(结核杆菌对青霉素不敏感):大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌,它们能产生外毒素使人致病,可以选择青霉素族,头孢曲松钠等。
革兰氏阴性菌,大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌,它们产生内毒素,靠内毒素使人致病。而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感,可以选择氟喹诺酮类药物如诺氟沙星,左氧氟沙星等,也可以选择大环内酯类比如克拉霉素、罗红霉素等。所以首先区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌,在选择抗生素方面意义重大。
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原理:染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。革兰氏染色属复染法。
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰(Hans Christian Gram,1853年-1938年)于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系。
未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察阳性紫色阴性红色。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。
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革兰氏染色基本步骤 革兰氏染色基本步骤和意义
革兰氏染色基本步骤是:(1)涂片固定。(2)草酸铵结晶紫染1分钟。(3)蒸馏水冲洗。(4)加碘液覆盖涂面染约1分钟。(5)水洗,用吸水纸吸去水分。(6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。(7)蕃红染色液(稀)染1分钟后,蒸馏水冲洗。干燥,镜检。染色原理:革兰...
革兰氏染色分为哪几个步骤,其原理是什么?
步骤:初染(结晶紫→水洗→媒染(路革氏碘液)→水洗→脱色(95%酒精)→复染(潘红)→水洗→干燥、镜检 原理:细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异,主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物,乙醇能使它溶解,所以染色的前二步...
试述细菌革兰氏染色的方法步骤和机理,染色结果。举出G+和G—的细菌的...
【答案】: 基本步骤:①结晶紫初染色1分钟;②碘液媒染1分钟;③95%乙醇脱色;④番红复染1分钟。结果:G+细菌呈紫色,G-细菌呈红色。机理:G+细菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密,故遇脱色剂乙醇处理时,因失水而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇的处理不会融出缝隙,因此能...
简述革兰氏染色的步骤和原理
革兰氏染色的步骤一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。具体操作方法 1、干燥、固定涂片。2、结晶紫初染1min,水洗至无色。3、用碘液媒染约1min,水洗,用吸水纸吸去水分。4、用95%酒精进行脱色,30秒后立即水洗,吸去水分。5、滴加番红液复染2min后水洗,吸去水分。6、干燥,镜检。原理 G+...
革兰氏染色的步骤和原理
革兰氏染色的步骤和原理如下:步骤:1、首先在载玻片上滴一小滴蒸馏水,用灼烧过的接种针挑取少量细菌,置载玻片的水滴中与水混合并涂抹开,注意涂抹要均匀平坦,涂抹后直径约为1 cm的薄层。2、固定。将载玻片在火焰上方固定。3、染色。加路哥式碘液大概一滴,作用1 min后用水冲洗,注意流水不要直接...
革兰氏染色的步骤和原理
革兰氏染色的步骤和原理如下:原理:革兰氏染色是基于细菌细胞壁成分的差异来进行鉴别的一种染色方法。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要由肽聚糖组成,且结构较厚,当用革兰氏染色液处理时,碘液与结晶紫结合较好,不易被乙醇脱色,因此保持初染的颜色。而革兰氏阴性细菌的细胞壁较薄,主要由脂多糖组成,使用...
革兰氏染色的步骤和原理是?
步骤:包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。原理:染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难...
革兰氏染色实验方法
革兰氏染色实验方法分为初染、媒染、脱色和复染四个步骤:涂片固定后,首先进行草酸铵结晶紫染色,时间为1分钟。染色后用自来水冲洗以去除多余染料。接着加入碘液,覆盖涂面染色约1分钟,然后再次水洗,吸去水分。进入脱色步骤,加数滴95%酒精并轻轻摇动,20秒后用清水冲洗,吸去酒精。接下来使用蕃红染色...
革兰氏染色步骤是什么?
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:1、涂片固定。2、草酸铵结晶紫染1分钟。3、蒸馏水冲洗。4、加碘液覆盖涂面染约1分钟。5、水洗,用吸水纸吸去水分。6、加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。7、蕃红染色液(稀)染1分钟后,蒸馏...
简述革兰氏染色的步骤和原理
1. 革兰氏染色的初步步骤包括干燥和固定涂片。2. 接下来进行初染,使用结晶紫染色1分钟,然后用水洗至无色。3. 使用碘液进行媒染,大约1分钟后水洗,并用吸水纸去除多余水分。4. 用95%酒精进行脱色,30秒后迅速水洗,再次用吸水纸去除水分。5. 滴加番红液进行复染,持续2分钟后水洗,去除多余水分...