革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。结果：革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别，染色反应不一样。现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物。
它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易脱色，阴性菌复合物结合程度底，吸附染料差，易脱色，这是染色反应的主要依据。
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阳性菌菌体等电点较阴性菌为低，在相同pH条件下进行染色，阳性菌吸附碱性染料很多，因此不易脱去，阴性菌则相反。所以染色时的染色液pH和染色时间等条件要严格控制。
例如，在强碱的条件下进行染色，两类菌吸附碱性染料都多，都可呈正反应； pH很低时，则都可呈负反应。此外，两类菌的细胞壁等对结晶紫-碘复合物的通透性也不一致，阳性菌透性小，故不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色。所以脱色时间、脱色方法也应严格控制。
参考资料来源：百度百科-革兰氏染色
涂片固定，草酸铵结晶紫染1分钟，蒸馏水冲洗，加碘液覆盖涂面染约1分钟，水洗，用吸水纸吸去水分，加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分，蕃红染色液（稀）染1分钟后，蒸馏水冲洗。干燥，镜检。
染色结果：革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
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临床意义
其重要的临床意义在于：
1、鉴别细菌；
2、选择药物；
3、与致病性有关：革兰氏阳性菌能产生外毒素，革兰氏阴性菌能产生内毒素；而内毒素主要是指革兰氏阴性菌胞壁成分中的脂多糖，两者的致病作用不同。
可能误差
在实验中经常会出现假阳性和假阴性的结果，假阳性主要是由于脱色不完全，可能是由于涂片过厚，或者是结晶紫染色过度，导致脱色不完全。
假阴性可能是因为细胞固定过度，造成细胞壁通透性的改变，而出现假阴性结果；另外，细胞培养时间太长，可能已经有部分细胞发生死亡或者自溶，也导致细胞壁通透性的改变而出现假阴性结果。
参考资料来源：百度百科-革兰氏染色
本回答被网友采纳革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是： 1）涂片固定。 2）草酸铵结晶紫染1分钟。 3）自来水冲洗。 4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。 5）水洗，用吸水纸吸去水分。 6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。 7）蕃红染色液（稀）染2分钟后，自来水冲洗。干燥，镜检。
结果
染色结果
革兰氏阳性菌都呈紫色，革兰氏阴性菌都呈红色。本回答被提问者采纳
结果：革兰氏阴性菌是红色，革兰氏阳性菌是紫色
